蛋白定量数据处理-利用Excel软件拟合标准曲线
1、将标准蛋白测得的OD值及对应的浓度输入Excel表格中,并求出重复测量的平均值。
2、将0ug/ml对照管的OD值减去,进行背景校正。
3、将标准浓度和对应的校正值转变为列。(复制,选择性黏贴,转置)
4、选中校正值和浓度的数值,然后找到excel工具栏“插入”,在下拉窗口中选择“散点图”图标,并选择不带曲线的散点图。
5、在弹出的“标准曲线”图中,找到任意一个“散点”,右击该点,在弹出的菜单中选择“添加趋势线”。
6、接着会弹出一个参数选择窗口,在该窗口中选择“线性”趋势线,并勾选”显示公式“、”显示R平方值“。
7、不同的Excel版本,略微有些区别,选定参数后,点击“确定“。即可得到完整的标准曲线。一般R平方值≥0.99,即说明该拟合曲线可以使用。
8、将测得的未知蛋白OD值代入标准曲线公式”y = 1316.5x – 3.6272“中,即可求得未知蛋白的浓度。