质粒封面图

microRNA载体构建

载体构建(vectorconstruction),为把DNA分子运送到受体细胞中去,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。载体构建即是构建含外源DNA的质粒。
MicroRNA (miRNA) 是一类由内源基因编码的长度约为22 个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。在动植物以及病毒中已经发现有28645个miRNA 分子(Release 21: June 2014) 。大多数miRNA 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇(cluster) 的形式存在于基因组中。miRNA可以通过破坏靶mRNA的稳定性、抑制靶mRNA的翻译来对靶mRNA发挥调控作用。
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  • 质粒类型:
  • • miRNA前体过表达质粒
  • • miRNA靶标过表达质粒
  • • miRNA抑制过表达质粒
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  • 表达系统:
  • • 哺乳动物表达系统
  • • 慢病毒表达系统
  • • 昆虫细胞表达系统
  • • 酵母细胞表达系统
  • • 大肠杆菌表达系统
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  • 蛋白标签:
  • • 荧光标签              eGFP, eYFP, eCFP, mCherry
    • 多功能标签            HaloTag®, AviTag™
    • 促溶解度和纯化标签    His, SUMO, GST, MBP, Flag, 3xFlag
    • 抗体免疫共沉淀标签    HA, cMyc
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  • • 有效片段合成
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  • 亚克隆
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  • • 质粒扩增
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  • 1-2周交付
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  • 目的基因IDCDS序列NM_XXXXX.X)或目的基因信息

     

  • • 载体骨架要求(表达系统类型,蛋白标签类型,筛选标记类型,启动子类型等)

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    • 质粒/甘油菌

    • 质粒说明书

     

  • QPCR检测

     

    • 慢病毒包装服务

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    过表达稳定株筛选
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