IF样图2

IF(免疫荧光)检测服务

免疫荧光染色技术是将荧光素作为抗体标记物进行免疫组织化学染色,带有荧光素的抗体孵育后可以直接使用荧光显微镜观测。该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快;缺点是由于荧光素有一定的淬灭周期,玻片无法长期保存,需要在染色结束后尽快进行镜下观测分析。
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         常用的荧光显微镜一般有三个通路,激发波长为350nm、488nm、555nm附近,分别对应的荧光发射光颜色为蓝光、绿光、红光。
350nm常用荧光素:DAPI(复染用),Alexa Fluor 350
488nm常用荧光素:FITC,Alexa Fluor 488
555nm常用荧光素:PE、Cy3、Rhodamine B、Alexa Fluor555
另有其他常见荧光素
594nm常用荧光素:Texas Red、Alexa Fluor594
647nm常用荧光素:Cy5、APC、Alexa Fluor647

       免疫荧光双重染色荧光双染或多重染色是指将带有不同荧光素标记的抗体孵育在同一张切片上,镜下观察时将不同的颜色组合在一起,将不同的抗原表达情况一起呈现出来,这样分析多个抗原的关联性更客观、更直接。
荧光双染也有直接法和间接法。直接法是使用带有不同荧光素标记的两个抗体同时孵育后观测;间接法需要用到两个不同种属来源的一抗(例如一个鼠源抗体,一个兔源抗体),后面要选择与一抗相对应的二抗同时需要带有不同的荧光素标记(例如FITC标记山羊抗小鼠和Cy3标记山羊抗兔),间接法需要同时兼顾一抗和二抗的种属关系,避免出现相互的交叉反应。

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  • • 普通荧光显微镜拍照
  • • 激光共聚焦拍照(可选)
  • 全片荧光扫描(可选)
  • 1-2周交付
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    • 待测样本(组织)或细胞爬片

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    • 一抗抗体(可代购)

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  • • 切片或爬片

     

    原始图片及数据

     

    实验报告

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