P19小鼠畸胎瘤细胞
P19细胞株是从C3H/He小鼠中诱导的畸胎癌中建立的。 在含有0.1mM 2-巯基乙醇的培养基中克隆的效率高。 细胞具有多能性。 在500nM 维生素A酸诱导下细胞可以分化成神经和神经胶质样细胞。 在0.5%到1.0% 二甲亚砜(DMSO) 存在下,细胞分化形成心脏和骨骼肌样基质,但不形成神经或神经胶质样细胞。 在DMSO和维生素A酸同时存在时,细胞的分化与只有维生素A酸一样。
注意事项:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护。
1、低温保存的细胞非常脆弱,请将冻存管放入37°的水浴中解冻,尽快复苏细胞。
4、将冻存管放入37°水浴中解冻,握住冻存管晃动,直到内容物完全融化。立即将冻存管从水浴中取出,擦干并喷洒75%乙醇,移至无菌区。
5、小心地拆卸盖子,不要触碰到里面的螺纹,用移液枪轻轻吸出细胞,加入到准备好的培养瓶中。
6、轻轻摇动培养瓶使细胞均匀分布。如有必要,松开阀盖,以便气体交换。
传代:收到细胞后,请对细胞培养瓶外表进行消毒,将细胞置于培养箱中进行1-2小时的缓冲,待细胞恢复基本生长状态后,进行后续细胞实验。
1、细胞未长至85%时,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,若培养瓶上无特殊标注,吸去剩余培养液,只留6-8ml培养液继续培养。
2、细胞已长满(达85-95%)。即可进行传代,具体步骤如下:
③将细胞收集于离心管中离心1000rpm/5min,弃上清,轻弹管底,将细胞弹散;
⑤如果没有特别说明,建议收到细胞后的第一次传代比例为 1:2。
注: 1、观察细密度最好用(4X物镜)低倍镜观察,以便正确的判断细密度;观察细胞状态请用(10X或20X)高倍镜观察;
4、此细贴壁不牢,移动或操作时应小心,如发现细胞有脱落,可离心重悬后接种到新瓶内。
保存:冻存条件: 70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO
1、在收到细胞后先观察培养瓶是否破裂,漏液等,如遇到上述问题请及时拍照并与我们联系。